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如何大規模培養動物細胞(下)
更新時間:2021-09-23 瀏覽次數:2629
連續式培養
連續式培養是一種常見的懸浮培養模式,采用機械攪拌式生物反應器系統。
理論上講,該過程可無限延續下去。連續培養的優點是反應器的培養狀態可以達到恒定,細胞在穩定狀態下生長。穩定狀態可有效地延長分批培養中的對數生長期。
在穩定狀態下細胞所處的環境條件如營養物質濃度、產物濃度、pH值可保持恒定,細胞濃度以及細胞生長速率可維持不變。細胞很少受到培養環境變化帶來的生理影響,特別是生物反應器的主要營養物質葡萄糖和谷氨酰胺維持在一個較低的水平,從而使它們的利用效率提高,有害產物積累有所減少。
然而,在高的稀釋率下,雖然死細胞和細胞碎片及時清除,細胞活性高,最終細胞密度得到提高,可是產物卻不斷在稀釋,因而產物濃度并不提高;尤其是細胞和產物不斷地稀釋,營養物質利用率、細胞增長速率和產物生產速率低下。
由于是開放式操作,加上培養周期較長,容易造成污染,在長周期的連續培養中,細胞的生長特性以及分泌產物容易變異;
灌注式培養
灌注式培養,也稱灌流式培養,是連續式培養常見的方式。
(1)攪拌式生物反應器
用于懸浮細胞培養,這種反應器必須具有細胞截流裝置,細胞截留系統開始多采用微孔膜過濾或旋轉膜系統,最近開發的有各種形式的沉降系統或透析系統。
(2)固定床或流化床生物反應器
固定床是在反應器中裝配固定的籃筐,中間裝填聚酯纖維載體,細胞可附著在載體上生長,也可固定在載體纖維之間,靠攪拌中產生的負壓,迫使培養基不斷流經填料,有利于營養成分和氧的傳遞,這種形式的灌流速度較大,細胞在載體中高密度生長。
圖 01
片狀載體在生物反應器上使用的一般流程
連續灌注培養是近年用于動物細胞培養生產分泌型重組治療性藥物和嵌合抗體及人源化抗體等基因工程抗體較為推崇的一種方式。這種方法最大的缺點是污染幾率較高以及長期培養中細胞分泌產品的穩定性、規模放大過程中工程問題。
針對這些使用生物反應器培養細胞中的一些痛點,搏旅提供了一系列的解決方案,采用理念與技術,打造出一批批精品的生物反應器,為客戶提供反應器和技術服務。
圖 02
固流床細胞生物反應器
細胞工廠培養
細胞工廠是一種設計精巧的細胞培養裝置。它在有限的空間內利用了培養表面,從而節省了大量的廠房空間,并可節省貴重的培養液。
同時,與NUNC的細胞工廠操作儀結合使用,可全面實現細胞培養的自動化,從而大大地減低勞動強度和密集度。這套系統使用很方便,可產生類似塑料培養瓶的效果。
圖 03
細胞工廠系統
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